Изолированные глаза крыс промывали в 70% этиловом спирте и в двух сменах стерильного фосфатного буфера (DPBS; «Sigma»). Сетчатку выделяли в охлажденном DPBS, содержащем 0,8% глюкозы (G1 — DPBS). Цельную сетчатку промывали раствором антибиотиков и
В работе было использовано 90 эксплантатов сетчатки семидневных крыс: 30 эксплантатов культивировали с PEDF (из них 5 эксплантатов использовали для проведения Вестернблот анализа), 30 — культивировали с Авастином (из них 5 эксплантатов использовали для проведения Вестерн-блот анализа), 30 эксплантатов входили в группу контроля (из них 5 эксплантатов использовали для проведения Вестерн-блот анализа).
Материал и методы
Цель работы — изучение влияния рекомбинантного PEDF и Авастина на состояние органотипических культур сетчатки.
Однако для того, чтобы оценить перспективы и возможность применения этого фактора в клинической офтальмологии, необходимо проведение дальнейших экспериментальных исследований, направленных на изучение влияния PEDF на состояние сетчатки. В настоящее время в качестве экспериментальных моделей ряда патологий широко используются различные типы клеточных и тканевых культур. Наиболее перспективными для проведения исследований являются органотипические культуры сетчатки, обладающие следующими преимуществами: сохранность цитоархитектоники; отсутствие нейро-гуморальных воздействий; возможность создать модель, максимально соответствующую поставленным задачам.
Безусловный интерес PEDF представляет еще и в связи с тем, что он обладает нейротрофическим действием. Он поддерживает нормальное развитие фоторецепторов и экспрессию в них зрительного пигмента после гибели пигментного эпителия сетчатки [5], оказывает нейропротективное действие на фоторецепторы сетчатки при световом [2] и глутаматном повреждении [7], обладает способностью поддерживать выживание ретинальных нейронов после вызванной перекисью водорода гибели клеток in vitro [1].
PEDF — белок с молекулярной массой 50 килоДальтон, относится к классу серпинов, ингибиторов сериновых протеаз [8, 9]. Синтезируется в клетках пигментного эпителия сетчатки [11], содержится в высоких концентрациях в интерфоторецепторном матриксе и стекловидном теле, в более низких — в роговице, хрусталике и внутриглазной жидкости [9, 10, 11].
Для достижения же необходимого эффекта, в такой системе необходимо наличие динамического баланса. Одним из представителей наиболее активных ингибиторов ангиогенеза является фактор пигментного эпителия (pigment epithelium-derived factor PEDF) [3, 4, 6].
На сегодняшний день перспективы проведения коррекции аномального ангиогенеза связаны, в основном, с группой препаратов (Луцентис, Авастин), являющихся блокаторами ангиогенного стимулятора — сосудисто-эндотелиального фактора роста — VEGF, т.е. только одного из звеньев антогонистической системы.
Несмотря на различие этиологических факторов в основе развития целого ряда патологий сетчатки, таких как возрастная макулярная дегенерация, диабетическая и посттромботическая ретинопатия, ретинопатия недоношенных и т.д., лежат процессы патологического ангиогенеза, которые развиваются в результате дисбаланса между про-ангиогенными (VEGF — сосудисто-эндотелиальный фактор роста, FGF фактор роста фибробластов, ангиогенин, интерлейкин 8) и антиангиогенными (ангиостатин, эндостатин, PEDF — фактор пигментного эпителия, PF4 — фактор тромбоцитов 4) факторами.
Источник УДК:617.735Тахчиди Х.П., Гаврилова Н.А.. Ланевская Н.И., Тищенко О.Е., Борзенок¹ С.А., Шацких¹ А.В., Сабурина² И.Н., Сергеев² С.А., Павлова³ Г.В., Рыбалкина³ Е.Ю., Ревищин³ А.В.Сравнительная харктеристика влияния фактора пигментного эпителия (PEDF) и Авастина на органотипические культуры сетчатки1 2 3 4 В настоящее время одной из важнейших медико-социальных проблем в отечественной и зарубежной офтальмологии является патология сетчатки, приводящая к значительному снижению зрения, слепоте и инвалидности. Функциональная реабилитация сетчатки при патологии различного генеза в настоящее время остается актуальной задачей.
Сравнительная харктеристика влияния фактора пигментного эпителия (PEDF) и Авастина на органотипические культуры сетчатки
Комментариев нет:
Отправить комментарий